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水果中乙烯含量测定气相色谱法

发布时间: 2024-01-11  点击次数: 334次

乙烯含量测试方法,气相色谱法测定乙烯


乙烯(ethylene)是植物内源激素之一,以气体形式存在。准确测定乙烯释放量,对认识乙烯在植物抗逆生理、发育生理、开花生理中的作用有着重要的意义。

一、目的及原理了解气和色谱仪的基本操作,了解气和色谱仪测定乙烯的原理。

气相色谱具有灵敏度高,稳定性好等优点。色谱仪中的分离系统包括固定相和流动相。由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同,因此各种物持的分配系数(或吸附能力)不一样。当含混合物的待测样(含乙烯的混合气)进入固定相以后,不断通以流动相(通常为N2H2),待测物不断地再分配,最后,依照分配系数大小顺序依次被分离,并进入检测系统得到检测。检测信号的大小反映出物质含量的多少,在工作站上就呈现色谱图。要使待测物得到充分的分离,就需要一种合适的固定相。乙烯往往与乙炔、乙烷难以分离,而采用GD×502作为固定相则可有比较满意的效果。

二、材料、仪器设备及试剂

()材料:苹果。

()仪器设备:1. 密封装置为带空心橡皮塞的三角瓶,或真空干燥器。2. GC-9280气相色谱仪。

()试剂:标准乙烯。

三、实验步骤

1. 将试验材料进行不同的处理(如离体、伤害、发芽、黑暗、辐射、冷藏、催熟等),然后置于密封装置中若干时间。

2. 将色谱仪启动。启动步骤如下:(1)检测仪器各部件是否复位。若没有,需复位。(2)打开流动相(N2),将压力调至(5kg/cm2)。然后打开仪器上的N2阀,将流速调至25m/min(管道12一样)(3)插上电源,打开仪器上电源开关。(4)调节柱温至60℃,将进样口温度调至100(乙烯为气体,进样口温度不需太高)(5)打开点火装置电源及空气压缩机开关、调节适当的量程和衰减(range and attenuation)(关机时,量程应打至1,衰减为∞)(6)打开钢瓶氢气阀,调压力为1.0kg/cm2)(两管道一样),同时将空气压力调至0.5kg/cm2。打开记录仪电源,并选择10mV的输出电压和适当的走纸速度(10nm/min)(7)点火:空气和氢气调好后,将选择键打到ON位置。按点火键10S左右,氢气既可在燃烧室燃烧,在点火并点着时,可以看到记录笔向上移动。(8)条件选择:将选择键打到2,并将空气压力调至1.0kg/cm2,氢气调至0.50.7kg/cm2之间(两管道一样)。待基线稳定后即可正式测定。

3. 测定(1)取一定浓度(μl/L,以N2作为稀释剂),一定量(1001000μl)的标准乙烯进样,并注意出峰时间。待乙烯峰至顶端时即为乙烯的保留时间,重复34次,得到平均值。该平均值即作为样品中乙烯定性的依据之一。(2)取同样量的待测样品,注入色谱柱(进样)。待样品峰全部出完后,即可做下一个样品。(3)定性:A.外标法定性:样品中与标准乙烯保留时间相同的峰,即为样品乙烯峰。B.内标法定性:在得到某一样品的色谱图后,向该样品中加入一定量的标准乙烯进样,若某峰增高,该峰即为样品中乙烯峰。4.待得到所有样品色谱图后,可关机,关机步骤:(1)关掉氢气总阀或氮气总阀。(2)关掉空气压缩机。(3)将量程或衰减复位,选择键打到OFF(4)关掉记录仪。(5)H2N2全部排完后,将所有阀复位。(6)关主机电源,并拔下插头。


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